一种筛选胞外纤维素酶产生菌的快捷、灵敏、有效的方法

• 作者: 宋华文 崔丽娇 杨晓红 江黎明 王洁 罗辉 陈晨
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 胞外纤维素酶 真菌 平板筛选 碘液熏染 β-葡萄糖苷酶 对硝基苯酚-β-1,4-葡萄糖
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 生物实验室
• 页码范围: 1175-1183
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150147

摘要

[目的]建立一种能快捷、灵敏、有效筛选高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生菌的方法,用于胞外纤维素酶产生菌检测筛选.[方法]将以微晶纤维素(Avicel)或羧甲基纤维素(CMC)为底物的胞外纤维素酶产生菌平板筛选法常用的刚果红或碘液浸泡染色改为碘液熏染,减少碘液的消耗和对环境的污染;建立以对硝基苯酚-β-1,4-葡萄糖苷(pNPG)为底物的β-葡萄糖苷酶发色底物平板筛选法;将两方法串联用于高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生菌的筛选.[结果]建立了分别以CMC和Avicel为底物结合碘液熏染的胞外纤维素酶产生菌平板筛选法和以pNPG为底物的β-葡萄糖苷酶发色底物平板筛选法,从56株真菌中筛选出了8株纤维素酶活性水平为++++的胞外纤维素酶产生菌,从后者筛选出4株高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生菌.[结论]将以CMC和Avicel为底物结合碘液熏染的平板筛选法和以pNPG为底物的发色底物平板筛选法串联,可快捷、灵敏、有效地用于高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生菌的筛选.