信号肽优化在枯草芽孢杆菌体系中对脂肪酶LipS分泌表达的影响

• 作者: 吴坚平 周勇 徐刚 杨立荣
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂肪酶 信号肽 筛选 分泌表达
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 42-49
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20150907

摘要

枯草芽孢杆菌具有良好的安全性和优异的外分泌能力,是目前常用的脂肪酶异源分泌表达体系.在枯草体系中如何提高脂肪酶分泌量是目前的研究热点.该体系中信号肽与目的基因不匹配和目标蛋白总表达量不高是导致脂肪酶LipS分泌表达效果较差的重要原因.针对这些问题,依据信号肽结构特征的不同(正电荷与疏水氨基酸个数的差异)对枯草芽孢杆菌体系中Sec和Tat这两个主要分泌途径的信号肽进行了筛选,结果显示Tat途径中的phoD信号肽分泌效果明显优于其他信号肽.在此基础上,通过替换使用诱导型表达载体、突变优化phoD信号肽,并考察了表达条件的影响,显著提高了脂肪酶LipS的分泌表达量,发酵液中转酯酶活达到62.07U/L,占总酶活的62.30％,较原始分泌表达体系的分泌量提高了13.7倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨立荣	浙江大学化学工程与生物工程学院	117	903	14.0	25.0
2	徐刚	浙江大学化学工程与生物工程学院	84	500	11.0	17.0
3	吴坚平	浙江大学化学工程与生物工程学院	99	759	12.0	23.0
4	周勇	浙江大学化学工程与生物工程学院	18	161	7.0	12.0