猪杀菌/通透性增加蛋白基因siRNA载体构建及干扰效果评价

• 作者: 包文斌 吴圣龙 吴正常 夏日炜 孙寿永 朱国强 殷学梅
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 BPI基因 siRNA载体 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 491-496
• 页数: 6页
• 分类号: S828.2
• 字数: 4081字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.03.020

摘要

本研究旨在构建并筛选猪(Sus scrofa)BPI基因的高效siRNA干扰载体,为在细胞水平上研究猪BPI基因的功能和作用机制提供基础.参照猪BPI基因(GenBank登录号:EF436278)全长编码区序列,设计其特异性发夹siRNA干扰片段,并将其克隆插入pcDNA 6.2-GW/EmGFPmiR干扰载体中,构建猪BPI基因4个干扰siRNA表达载体RB1、RB2、RB3和RB4,1个阴性对照NC,并通过PCR和测序进行验证,构建成功后转染猪小肠上皮细胞IPEC-J2并检测其干扰效率.结果发现,所构建的4个特异性siRNA载体均可显著降低猪BPI基因mRNA表达(P＜0.05),其中RB4载体干扰效果最好,其干扰效率达到69％.本研究成功筛选可靶向干扰猪BPI基因的高效siRNA,为今后在细胞水平进一步研究BPI基因对猪肠道革兰阴性菌感染抗性的作用及其机制奠定了试验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包文斌	扬州大学动物科学与技术学院	132	942	16.0	25.0
2	朱国强	扬州大学兽医学院	183	1462	21.0	30.0
3	吴圣龙	扬州大学动物科学与技术学院	95	641	14.0	20.0
4	孙寿永	扬州大学动物科学与技术学院	18	147	7.0	11.0
5	吴正常	扬州大学动物科学与技术学院	12	45	4.0	6.0
6	殷学梅	扬州大学动物科学与技术学院	7	43	3.0	6.0
7	夏日炜	扬州大学动物科学与技术学院	13	46	4.0	5.0