柳蚕小热休克蛋白20.8基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘朝良 李胜 王芳 钱岑
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 柳蚕 小热休克蛋白 克隆 原核表达 免疫刺激 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S885.9|Q78
• 字数: 4713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2015.04.005

摘要

小热休克蛋白(SHSPs)是从细菌到哺乳动物中广泛存在的一类热应急蛋白质,可调控蛋白的折叠和保护有机体免受外界压力。克隆获得了一个柳蚕shsp的开放阅读框(ORF)序列。该基因cDNA序列全长561 bp,编码了一个由186个氨基酸组成的蛋白。预测蛋白分子质量20.8 ku，等电点为5.98,故命名为As-SHSP 20.8。序列分析和进化树构建结果表明, As-shsp20.8与已知的昆虫shsps家族具有很高的同源性,且与家蚕的shsp20.8聚在同一进化分支上。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)结果表明, As-shsp20.8在柳蚕的各组织中均有分布,但在脂肪体中表达量最高；且As-shsp20.8可被大肠杆菌和白僵菌诱导高表达,推测其可能参与了柳蚕的免疫反应。同时,利用pET-28a (+)载体对As-shsp 20.8进行了原核表达,并对重组表达蛋白进行了纯化和抗体制备。将为进一步探索As-SHSP 20.8的免疫功能奠定前期基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘朝良	安徽农业大学生命科学学院	93	675	15.0	20.0
2	钱岑	安徽农业大学生命科学学院	13	30	4.0	5.0
3	王芳	安徽农业大学生命科学学院	35	57	4.0	5.0
4	李胜	安徽农业大学生命科学学院	4	5	2.0	2.0