表达抗原 Rv3478的重组卡介苗的实验研究

• 作者: 孔聪 宋娜 徐颖 朱琳 李光华 王洪海 粟海波 黄琪
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 结核病 重组卡介苗 Rv3478 疫苗
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 359-366
• 页数: 8页
• 字数: 6972字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.05.007

摘要

目的：本研究选取结核杆菌优秀抗原Rv3478，构建重组疫苗rBCG：Rv3478并对其进行免疫原性评价。方法 PCR扩增基因Rv3478，构建重组质粒Rv3478-pMV261之后电转进入BCG感受态细胞中，另外将扩增的基因片段导入pET-28a中，构建表达载体Rv3478-pET-28a（ BL21）表达蛋白Rv3478，蛋白免疫小鼠获取多克隆抗体，蛋白印迹方法筛选得到表达Rv3478的重组卡介苗；用构建好的重组卡介苗刺激巨噬细胞，收集细胞培养上清 ELISA 检测细胞因子的分泌；重组疫苗rBCG：Rv3478（R3）免疫小鼠，PBS、BCG、BCG：pMV261（R0）作对照组。分别在免疫4周和12周后处死小鼠，用ELISPOT、ELISA、流式细胞术等方法检测疫苗细胞免疫和体液免疫水平。结果成功表达蛋白Rv3478，免疫小鼠后获得多克隆抗体；成功构建重组疫苗R3；免疫小鼠后，能够引发强烈的细胞免疫应答（强烈的IFN-γ反应，高水平的TNF-α的分泌），促进外周血CD4＋／CD8＋T细胞比例增加， CD44＋CD62L＋T细胞百分比增加。结论构建的重组疫苗R3能够引发强烈的免疫应答，显示出良好的免疫原性，具有良好的抗结核潜力，值得进一步研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪海	复旦大学生命科学学院	97	667	13.0	21.0
2	朱琳	复旦大学生命科学学院	22	81	5.0	8.0
3	李光华	复旦大学生命科学学院	4	11	2.0	3.0
4	徐颖	复旦大学生命科学学院	9	93	4.0	9.0
5	宋娜	复旦大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0
6	黄琪	复旦大学生命科学学院	5	9	2.0	3.0
7	孔聪	复旦大学生命科学学院	3	9	2.0	3.0
8	粟海波	复旦大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0