结核菌重组基因rBCG-Rv2029c的克隆表达及免疫原性分析

• 作者: 党颍徐 夏西超 王涵 薛士鹏 薛婷
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Rv2029c 克隆 免疫
• 年，卷（期）: 2019,（13）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1604-1608
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.13.014

摘要

目的:用结核分枝杆菌特异性抗原Rv2029构建结核重组疫苗(BCG-Rv2029),在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应,并初步探讨其免疫机制.方法:PCR扩增基因Rv2029,构建重组质粒pMV261-Rv2029,转入卡介苗感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv2029蛋白.以重组的rBCG-Rv2029c活疫苗为免疫原,皮下免疫C57BL/6小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血抗原特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,XTT检测脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应,流式细胞仪观察CD4+T和CD8+T细胞比例变化,IFN-γ、IL-2检测试剂盒检测细胞培养基中细胞因子表达水平.结果:成功构建重组疫苗BCG-Rv2029C,并诱导表达重组蛋白.经免疫小鼠后,重组卡介苗rBCG-Rv2029c能诱导较BCG更高的IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度水平,IgG2a/IgG1的变化提示rBCG-Rv2029c可诱导Th1型免疫反应.与BCG相比,rBCG-Rv2029c可诱导产生更强的特异性细胞增殖反应、刺激产生更多的杀伤性CD8+T细胞和CD4+T细胞、能诱导产生更高水平的IFN-γ、IL-2细胞因子.结论:重组结核病疫苗rBCG-Rv2029c可诱导产生较BCG更强且针对休眠MTB的特异性体液免疫和细胞免疫,是一株值得深入研究的新型结核病疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏西超	平顶山学院医学院	26	26	3.0	3.0
2	薛士鹏	南阳医学高等专科学校基础医学部	18	20	3.0	3.0
3	王涵	南阳医学高等专科学校基础医学部	1	0	0.0	0.0
4	薛婷	南阳医学高等专科学校基础医学部	1	0	0.0	0.0
5	党颍徐	南阳医学高等专科学校基础医学部	1	0	0.0	0.0