结核分枝杆菌Rv0577基因在毕赤酵母的表达及重组抗原活性鉴定

• 作者: 严延生 何似 王加熊 王灵岚 肖方震 邓艳琴
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Rv0577 毕赤酵母 基因表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1002-1005
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91
• 字数: 3212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.11.003

摘要

目的 在毕赤酵母表达结核分枝杆菌Rv0577基因并鉴定重组蛋白抗原活性.方法 从结核分枝杆菌标准株H37Rv扩增Rv0577基因,TA克隆进入pGEM(R)-T Easy载体,再亚克隆进入pPICZαA.重组质粒pPICZαA-Rv0577经双酶切鉴定并测序证实,线性化后电转化导入毕赤酵母X 33表达;采用Western blot 和Dot blot鉴定抗原活性.结果 双酶切及测序鉴定均证实获得Rv0577基因的正确克隆.pPICZαA-Rv0577在X 33分泌表达的目的 蛋白,通过硫酸铵沉淀、HPLC顺序纯化,获得的纯化蛋白与结核病患者血清进行Dot blot,7份中有3份反应阳性.结论 Rv0577基因在毕赤酵母获得高效表达,重组抗原可被结核病患者血清识别,具有抗原活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严延生		161	1086	15.0	24.0
3	王灵岚		48	282	9.0	13.0
4	何似		31	182	7.0	11.0
5	邓艳琴		33	162	6.0	11.0
7	肖方震		20	59	5.0	6.0
10	王加熊		7	18	2.0	4.0