猪腺病毒3型SYBR Green Ⅱ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 刘小琬 刘鹏娟 徐志文 方和俊 朱玲 李萍 杨凡 郭博 黄剑波
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪腺病毒3型 SYBR Green Ⅱ 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1148-1152
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2015.11.008

摘要

为建立一种针对猪腺病毒3型(PADV3)的检测方法,根据PADV3 E1B基因保守序列设计1对引物,建立了检测PADV3的SYBR GreenⅡ实时荧光定量PCR.结果显示,该方法不能对猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、大肠杆菌、猪链球菌2型检测到荧光信号,特异性好;检测PADV3时在3.7×102～3.7×109 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增产物的熔解曲线仅出现单一特异峰,无引物二聚体,熔解温度为90.5℃;该方法组内变异系数为0.17％～1.23％,组间变异系数为0.73％～2.23％,重复性较好.应用该方法对临床56份腹泻粪便检测,检出11份阳性,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100％.上述结果表明,建立的实时荧光定量PCR为PADV3感染的早期诊断、流行病学调查奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲		151	499	13.0	17.0
2	徐志文		184	909	15.0	20.0
3	李萍		20	68	3.0	8.0
4	杨凡		11	16	3.0	4.0
5	黄剑波		14	36	4.0	6.0
6	刘鹏娟		9	25	3.0	5.0
7	郭博		6	7	2.0	2.0
8	刘小琬		9	3	1.0	1.0
9	方和俊		7	7	2.0	2.0