金黄仓鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织器官中的差异表达

• 作者: 周生来 张婀娜 杨葳 董婉维 赵文 郑志红 郭晓冲 魏政立
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 金黄仓鼠 载脂蛋白A5(Apoa5) 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 283-287
• 页数: 5页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.04.004

摘要

目的 构建金黄仓鼠载脂蛋白A5(Apoa5)基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析,为深入研究Apoa5基因在金黄仓鼠不同组织中功能奠定基础.方法 提取金黄仓鼠肝脏组织总RNA,采用RT-PCR方法对金黄仓鼠Apoa5基因的cDNA进行克隆,构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞,分别采用RT-PCR和Western blot方法检测mRNA及蛋白质表达水平.采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5 mRNA在8个组织中的表达量.结果 经PCR检测鉴定,Apoa5基因表达载体构建成功,经测序分析金黄仓鼠Apoa5基因cDNA全长1 243 bp,编码366个氨基酸,与人、大鼠、小鼠等物种比对,核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性,金黄仓鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75％、84％、84％.转染293T细胞48 h后,RT-PCR和Western blot结果表明,Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达.荧光定量PCR结果显示,Apoa5 mRNA在肝脏表达量最高,在脑和睾丸中中度表达,在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达.结论 成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异,为制备Apoa5转基因金黄仓鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄仓鼠脂类代谢中的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董婉维	中国医科大学实验动物部	38	293	11.0	16.0
2	郑志红	中国医科大学实验动物部	57	222	8.0	13.0
3	周生来	中国医科大学实验动物部	19	35	4.0	5.0
4	杨葳	中国医科大学实验动物部	29	100	6.0	8.0
5	郭晓冲	中国医科大学实验动物部	12	53	5.0	7.0
6	魏政立	中国医科大学实验动物部	10	24	3.0	4.0
7	赵文	中国医科大学实验动物部	11	6	1.0	1.0
8	张婀娜	中国医科大学实验动物部	8	3	1.0	1.0