C3H10T1/2成软骨分化过程中miR-19a与CCND1的表达及调控

• 作者: 代学俊 周治宇 李亮平 罗嘉全 邹学农 高蔓蔓 黄胜 龚铭
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: mircoRNA 间充质干细胞 成软骨分化
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 71-77
• 页数: 7页
• 分类号: R349.53
• 字数: 3515字
• 语种: 中文

摘要

[目的]在间充质干细胞诱导成软骨分化过程中,探讨miR-19a与细胞周期基因CCND1之间的关系,为揭示miR-19a参与调控成软骨分化的可能机制提供基础.[方法]选取小鼠间充质干细胞C3H10T1/2为研究对象,运用离心沉淀法进行pellet细胞微球培养,用含有TGF-β3及2％FBS的高糖DMEM进行成软骨诱导并作为实验组,用含2％FBS的高糖DMEM培养(替换)导作为对照组.分别在1、2、3周进行定量PCR检测成软骨分化相关基因表达以及在第3周进行甲苯胺蓝染色.[结果]与对照组比较,细胞功能基因Bax与Klf-4表达均下调,差异具有统计学意义(P＜0.05).成软骨分化关键启动因子SOX-9及相关基因aggrecan,collagen Ⅱ,Collagen Xa1的表达均在2周时显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).通过互联网生物信息学预测CCND1可能是miR-19a的靶基因;在成软骨分化过程中,miR-19a表达逐渐上升(P＜0.05),而CCND1的表达与对照组相比逐渐下降(P＜0.05).甲苯胺蓝染色pellet细胞微球呈蓝紫色,细胞核呈深蓝色,诱导组中细胞外基质含量明显增多.[结论]在C3H10T1/2成软骨分化过程中,miR-19a参与维持细胞干性及增殖基因表达降低,分化能力得到增强;且miR-19a参与该分化调控过程.