转盐生杜氏藻β-胡萝卜素羟化酶基因(chyb)烟草的获得及耐盐性鉴定

• 作者: 刘林 周静 孙娇璐 王何瑜 许峰 龚一富
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: β-胡萝卜素羟化酶基因(chyb) 载体构建 转化 耐盐性
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1149-1156
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.004

摘要

β-胡萝卜素羟化酶(β-carotene hydroxylase,chyb)作为盐生杜氏藻(Dunaliella viridis胡萝卜素合成代谢途径中的关键酶,催化β-胡萝卜素经两步反应合成玉米黄素.盐生杜氏藻chyb基因在植物抗逆性方面有重要研究价值.本研究利用前期克隆得到的盐生杜氏藻chyb基因(GenBank登录号:JN118489),构建了植物表达载体pC AMB IA3 301-chyb.通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404介导的叶盘法将其转入烟草(Nicotiana tabacum),获得16株草铵膦抗性再生植株,经PCR及RT-PCR扩增分析表明,chyb基因已转入其中13株烟草植株中,并可以进行正常转录.通过测定转基因烟草的株高、叶面积、叶绿素含量、叶片相对电导率和脯氨酸含量对转基因烟草的耐盐性进行了检测,结果表明,与对照组相比,转基因烟草的株高、叶面积、叶绿素含量均极显著提高(P＜0.01),其中转基因烟草平均株高为37.82cm,是对照组烟草平均株高的1.37倍.在100 mmol/L NaC1胁迫处理下,转基因烟草的成活率为84.45％,是对照组烟草的1.58倍;在200 mmol/L NaC1胁迫下对照组烟草萎蔫死亡,而转基因烟草仍可生长存活.经检测转基因烟草叶片的相对电导率升高但变化幅度较小,脯氨酸含量较对照组极显著增加(P＜0.01).研究结果说明转基因烟草的耐盐性得到了提高,为进一步探讨盐生杜氏藻chyb基因在植物耐盐性方面的功能提供基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚一富	宁波大学海洋学院	54	342	11.0	16.0
2	刘林	宁波大学海洋学院	9	35	4.0	5.0
3	王何瑜	宁波大学海洋学院	29	117	5.0	9.0
4	周静	宁波大学海洋学院	3	10	2.0	3.0
5	许峰	宁波大学海洋学院	4	11	2.0	3.0
6	孙娇璐	宁波大学海洋学院	1	4	1.0	1.0