电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

• 作者: 何高明 周平 姚建龙 李炜杰 杨娇 王聪慧 皮文辉 罗健 黄威
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊成纤维细胞 细胞转染 转染效率 条件优化
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 页码范围: 1481-1485
• 页数: 5页
• 分类号: S826
• 字数: 3672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2015.08.018

摘要

[目的]采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率.[方法]利用Lonza 4D-Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率.[结果]通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率.