桑树类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因的鉴定及主效基因功能分析

• 作者: UMUHOZA Diane 余茂德 刘长英 朱攀攀 李军 李镇刚 梁燕梅 赵爱春 鲁成
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 桑树 果实 类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶 UFGT基因 表达 酶活性分析
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 1919-1930
• 分类号: S663.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0114

摘要

根据同源比对,从川桑(Morus notabilis)基因组数据库(morus.swu.edu.cn/morusdb/)中鉴定类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因(MaUFGT)家族成员.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析MaUFGT在桑树各组织和发育期的表达水平.随着果实发育成熟,MaUFGT1、MaUFGT2和MaUFGT3的表达模式相似,均呈上升趋势;在从顶芽依次向下不同叶位中,3个UFGT基因表达呈现先降低后升高,再降低又升高的趋势;在幼茎皮层和托叶中大量表达,幼茎表皮和木质部、叶柄中表达量较低,有的甚至不表达.MaUFGT2的表达量在3个基因中都是最高的,推测其是该基因家族的主效基因.从桑树品种‘嘉陵40’成熟果实中克隆了UFGT2基因,命名为MaUFGT2,登录号KP455729.1.其cDNA全长为1 386 bp,编码461个氨基酸,推测蛋白质分子量约为51kD.序列比对结果发现所编码蛋白在不同物种间保守性不高.将MaUFGT2克隆到pET-28a(+)原核表达载体后在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析显示,融合蛋白大小约为55kD,主要以包涵体形式表达,在上清液中也有少量表达.MaUFGT2蛋白经纯化和复性后,最后通过高效液相色谱(HPLC)分析该蛋白的酶活性,结果表明,体外酶活性鉴定MaUFGT2能够催化UDP葡萄糖转移至槲皮素形成槲皮素3-β-D-葡萄糖苷,验证了其具有糖基转移酶的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁成	西南大学生物技术学院	116	646	13.0	17.0
2	余茂德	西南大学生物技术学院	76	514	13.0	19.0
3	梁燕梅	西南大学生物技术学院	3	16	3.0	3.0
4	赵爱春	西南大学生物技术学院	44	211	8.0	13.0
5	李军		52	184	8.0	11.0
6	刘长英	西南大学生物技术学院	8	30	3.0	5.0
7	朱攀攀	西南大学生物技术学院	13	49	5.0	6.0
8	UMUHOZA Diane	西南大学生物技术学院	1	3	1.0	1.0