基于熔解曲线分析技术的鹿茸药材分子鉴别

• 作者: 蒋超 袁媛 金艳 陈康 黄璐琦
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 高分辨熔解曲线 鹿茸药材 分子鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 资源与鉴定
• 页码范围: 619-623
• 语种: 中文
• DOI: 10.4268/cjcmm20150409

摘要

高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景.文章将高分辨率熔解曲线技术应用于鹿茸真伪鉴别,利用CO Ⅰ序列,在退火温度为60℃,45个循环数的条件下,建立正品鹿茸药材熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg2+浓度的适宜范围.结果表明,鹿茸药材在模板DNA质量浓度为10～100 mg·L-1、引物浓度0.2 μmol·L-1,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1的条件下,梅花鹿熔解曲线为双峰,其Tm分别为(81.96±0.07),(84.51±0.03)℃;马鹿熔解曲线为双峰,其Tm为(82.58 ±0.13),(85.95±0.05)℃.该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的鹿茸药材真伪鉴定.