SYBR Green Ⅱ荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立

• 作者: 刘光清 刘腾 吴巧梅 朱杰 李传峰 李琦 缪秋红 谭永贵 郭慧敏 陈宗艳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔病毒性出血症病毒 荧光定量PCR 熔解曲线 鉴别
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 2848字
• 语种: 中文

摘要

本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法.根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green Ⅱ荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰.结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2.