牛病毒性腹泻病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 任亚初 孙阳阳 张亮 朱彤 杨宏军 楚会萌 程凯慧 解晓莉
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 荧光定量PCR E2基因 检测
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·分析检测
• 页码范围: 106-110
• 页数: 5页
• 分类号: S858.23
• 字数: 3367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2019.12.022

摘要

本研究旨在建立一种灵敏度高、特异性强、重复性好,能快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法.根据BVDV的E2基因保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了检测BVDV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.将标准阳性样品10倍梯度稀释检测灵敏度,用能感染奶牛的其它病毒做对照检测特异性,用临床样本检测重复性.结果表明,该方法与能感染奶牛的其它几种病毒均无交叉反应,检出敏感度达4.87×101 copies/μL,比常规PCR检测方法高10倍.同时检测了5个规模化奶牛场送检的67份奶牛腹泻样本,其BVDV检出率为46.27％(31/67).本研究成功建立了BVDV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,为BVDV的快速诊断和定量分析提供了技术支撑,具有很好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	解晓莉	山东省农业科学院奶牛研究中心	10	10	2.0	2.0
2	孙阳阳	山东省农业科学院奶牛研究中心	6	5	2.0	2.0
3	程凯慧	山东省农业科学院奶牛研究中心	16	65	5.0	8.0
4	楚会萌	山东省农业科学院奶牛研究中心	9	16	2.0	3.0
5	张亮	山东省农业科学院奶牛研究中心	17	44	3.0	6.0
6	任亚初	山东省农业科学院奶牛研究中心	7	8	2.0	2.0
7	朱彤	山东省农业科学院奶牛研究中心	3	11	2.0	3.0