牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 岳丰雄 徐宏军 黄杰
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR 猪瘟病毒 疫苗
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 分类号: S852.653
• 字数: 3055字
• 语种: 中文

摘要

为了建立一种快速、特异、灵敏的检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV) Taq Man实时荧光定量RT-PCR的方法,根据NCBI GenBank上已公布的BVDV、猪瘟病毒(CSFV)核酸序列进行比对,利用Olig0 6.71软件设计一对引物及一条探针,建立了检测BVDV的Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法.通过对该方法的特异性、重复性及其敏感性进行相关试验,结果表明该方法检测出BVDV标准毒株Oregon C24V为阳性,猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和CSFV的检测均为阴性.对BVDV标准毒株最低检测量达到10-25 TCID50.该方法检测同一样品重复进行8次检测,结果均一致,表明方法的重复性较好.应用该方法对6批猪瘟疫苗专用血清进行BVDV检测,阳性率为16.7％;猪瘟弱毒苗中未检出BVDV.建立的BVDV Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法为生产无BVDV污染的猪瘟苗提供了有力的保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄杰		2	8	2.0	2.0
2	岳丰雄		7	28	3.0	5.0
3	徐宏军		7	52	4.0	7.0