牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 关平原 周伟光 朱洪伟 李新培 温永俊 程世鹏
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 鉴定 分型 反转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-12
• 页数: 7页
• 分类号: S852.653|Q789
• 字数: 5548字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立一种特异性检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的RT-PCR方法,并且可以实现在同一体系中对BVDV进行分型.根据GenBank中公布的BVDV基因组序列,针对高度保守的5′UTR区域分别设计鉴定及分型引物,建立牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法.应用鉴定RT-PCR检测方法可从BVDV阳性毒株中扩增出288 bp的特异性片段;而分型RT-PCR检测方法可在同一体系中从BVDV1型和2型毒株中扩增出大小分别为316 bp和110 bp的特异性片段,但对猪瘟病毒、牛副流感3型病毒及牛传染性鼻气管炎病毒等均为阴性,最低可检测出的病毒量分别为1 TCID50/mL和10 TCID50/mL.临床试验证明,建立的鉴定及分型RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,具有很高的实用价值,为进一步开展流行病学调查、病毒分离等提供可靠的技术手段.