牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 于学辉 冉多良 史茜 季新成 段琛 王克栋
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 内标 双重反转录-聚合酶链反应 共扩增
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5|Q789
• 字数: 4038字
• 语种: 中文

摘要

为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5'-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288 bp).为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152 bp).通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生.该方法的检测灵敏度约为100 TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性.通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36％.该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冉多良	新疆农业大学动物医学院	125	564	11.0	18.0
2	季新成		42	156	7.0	8.0
3	史茜		18	67	5.0	6.0
4	王克栋	新疆农业大学动物医学院	4	9	3.0	3.0
5	于学辉		18	66	5.0	7.0
6	段琛		3	9	2.0	3.0