新型小发卡RNA慢病毒表达载体的构建及抗乙型肝炎病毒应用评价

• 作者: 张婷玉 张秀娟 毛莹莹 王升启 王学军 胡伟
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 小发卡RNA 乙型肝炎病毒
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 510-514
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.04.014

摘要

目的：设计用于表达新型小发卡RNA（shRNA）的慢病毒载体，并考察其用于抗乙型肝炎病毒（HBV）的可行性。方法：对慢病毒载体骨架SapⅠ位点进行突变，并将用于表达新型shRNA的结构亚克隆到改造后的慢病毒载体；设计靶向HBV保守序列的shRNA并克隆到该慢病毒载体，包装含有shRNA序列的重组慢病毒并定量，考察单个及多个shRNA结构串联对慢病毒滴度的影响；将重组慢病毒感染HBV稳定转染肝细胞系HepG2.CW（MOI=3），用杀稻瘟菌素筛选稳定克隆1周后，将其重新消化，并以1×105/孔接种于24孔板，于铺板96 h后取细胞上清检测HBsAg、HBeAg表达水平和HBV DNA的含量。结果：构建了一种用于表达新型shRNA的慢病毒载体，并通过设计靶向HBV保守序列的shRNA实现了HBV复制的高效抑制；发现多个shRNA串联效果优于单个shRNA。结论：构建的新型shRNA慢病毒表达载体可作为防治慢性病毒感染如HBV感染的潜在有效手段之一，值得进一步研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启		315	3297	28.0	41.0
3	王学军	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	17	50	4.0	6.0
4	张秀娟	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	7	8	2.0	2.0
5	胡伟	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	6	17	3.0	4.0
8	张婷玉		1	0	0.0	0.0
12	毛莹莹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	0	0.0	0.0