基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法的建立

• 作者: 宇学峰 宋琳琳 朱涛 毛慧华 邓捷 邵忠琦 骆鹏
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 化学
• 关键词: 百日咳疫苗 效价 Luminex 多重检测 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 79-83
• 分类号: O656.31|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 建立基于Luminex技术的多组分百日咳疫苗血清抗体效价快速检测方法.方法 将百日咳类毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)、百日咳杆菌黏附素(pertactin,PRN)、百日咳菌鞭毛蛋白2,3型(fimbrial-2 and fimbrial-3,FIM 2,3)分别与4种不同型号的微球耦联,耦联的抗原在同一孔中与血清孵育,通过生物素标记抗体和链霉素标记藻红蛋白双重识别,用Luminex荧光检测得到荧光中位数值(MFI),进行效价分析,并通过百日咳标准血清建立五组分百日咳疫苗血清抗体检测的标准曲线.采用ELISA法检测同一组血清样品中的抗体效价,并对两种方法的检测结果进行比较.结果 与ELISA法相比,Luminex法的线性范围更宽.两种方法检测五组分百日咳疫苗血清抗体效价的分布范围接近,Luminex法检测50份五组分百日咳疫苗免疫小鼠血清抗体效价的平均值分别为FT 65.365 IU/ml、FIM 15.052 IU/ml、FHA 545.236 IU/ml、PRN 7.876 IU/ml,ELISA法检测的平均值分别为PT 72.640 IU/ml、FIM 16.480 IU/ml、FHA 589.474 IU/ml、PRN 7.345 IU/ml,两种检测方法的检测结果具有良好的相关性,相关系数(R2)分别为:PT 0.905 8、FIM 0.979 1、FHA 0.930 9、PRN 0.997 6.结论 与ELISA法相比,基于Luminex的多重分析物的检测方法具有减少样品消耗量、节省成本和测定时间、使多种目标分子之间相关性的分析更准确等优点,可用于五组分百日咳疫苗血清抗体效价的检测.