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人睾丸特异性新基因hTSC29合成肽单克隆抗体制备与鉴定
人睾丸特异性新基因hTSC29合成肽单克隆抗体制备与鉴定
作者:
冼英杰
周秀琴
唐爱发
李介华
蔡志明
陈彩蓉
陈润强
颜秋霞
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
人睾丸特异性新基因
合成肽
单克隆抗体
摘要:
目的:制备和初步鉴定人睾丸特异性新基因hTSC29( GenBank 登录号: BC032957)合成肽的单克隆抗体( mAb)。方法:利用生物信息学方法对hTSC29的蛋白质序列进行分析和预测,根据免疫原性、表露性、亲疏水性及柔韧性4个参数,合成一段由18个氨基酸组成的多肽,并以此为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,采用ELISA法、Western blot、免疫组化和免疫荧光法鉴定hTSC29 mAb的特异性。结果:获得了1株稳定分泌hTSC29 mAb的杂交瘤细胞株,分泌的抗体属IgG2b(κ)亚型,杂交瘤细胞培养上清效价达到1∶104;Western blot鉴定表明,制备hTSC29 mAb可特异性地识别人睾丸总蛋白中Mr约为60000处的蛋白;免疫组织化学和免疫荧光结果显示hTSC29蛋白主要定位在正常人睾丸组织中的精母细胞和精子细胞。结论:成功建立了1株稳定分泌抗hTSC29 mAb的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体效价高、特异性强,为进一步研究hTSC29的功能提供了特异的检测工具。
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篇名
人睾丸特异性新基因hTSC29合成肽单克隆抗体制备与鉴定
来源期刊
中国免疫学杂志
学科
医学
关键词
人睾丸特异性新基因
合成肽
单克隆抗体
年,卷(期)
2015,(11)
所属期刊栏目
免疫学技术与方法
研究方向
页码范围
1505-1509
页数
5页
分类号
R392.11
字数
5022字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1000-484X.2015.11.014
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
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(1)
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人睾丸特异性新基因
合成肽
单克隆抗体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国免疫学杂志
主办单位:
中国免疫学会
吉林省医学期刊社
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-484X
CN:
22-1126/R
开本:
大16开
出版地:
长春市建政路971号
邮发代号:
12-89
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7702
总下载数(次)
13
总被引数(次)
40225
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
广东省医学科研基金
英文译名:
官方网址:
http://www.medste.gd.cn/Html/sciedu/Class1189/Class1201/17922820070507155200.html
项目类型:
重点项目、面上项目、青年基金项目
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