羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立

• 作者: 庞方圆 张岩 李旭东 李浩 申之义 苏日娜
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 羊传染性脓疱病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1441-1445
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2015.09.08

摘要

根据GenBank已经发表的CEV参考毒株(登录号:AF097215)F1L基因序列,利用Primer Express 3.0软件设计合成1对特异性引物,以pMD19-T-63 bp重组阳性质粒作为标准品,建立了羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法.经过反应条件的优化,建立的羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的线性关系良好,标准曲线的相关系数R2 =0.99,扩增效率E=1.18.该方法敏感性高且特异性强,最低检出下限为65.47拷贝/μL,与羊痘和口蹄疫病毒均不发生交叉反应,重复性好,组内和组间变异系数分别为0.17％～0.59％和0.74％～1.25％.运用该方法对2例羊传染性脓疱病例进行检测,结果均为阳性.因此,可将该方法应用于临床诊断,具有准确、高效、快捷、灵敏的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏日娜	内蒙古农业大学兽医学院	55	180	7.0	12.0
2	申之义	内蒙古农业大学兽医学院	34	157	7.0	11.0
3	张岩	内蒙古农业大学兽医学院	20	122	6.0	10.0
4	庞方圆	内蒙古农业大学兽医学院	3	16	3.0	3.0
5	李旭东	内蒙古农业大学兽医学院	4	7	2.0	2.0
6	李浩	内蒙古农业大学兽医学院	4	51	3.0	4.0