禽流感病毒 H5、H7和 H9亚型一步法多重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 屈素洁 张步娴 施开创 李军 梁媛 粟艳琼 胡杰 莫胜兰 邹联斌
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H 5 亚型 H 7 亚型 H 9 亚型 一步法多重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5|S854.43
• 字数: 2583字
• 语种: 中文

摘要

为了建立能同时检测 H5、H7和 H9亚型禽流感病毒（AIV）的方法，参考 GenBank中 H5、H7和 H9亚型AIV的 HA基因序列的保守区域，利用Primer 5．0软件设计3对分别针对 AIV H5、H7和 H9亚型的特异性引物，预期特异扩增 H5 AIV片段大小为380 bp、H7 AIV为501 bp、H9 AIV为732 bp。经过反应条件的优化，建立了同时检测 H 5、H 7和 H 9亚型AIV的一步法多重 RT-PCR方法。该方法特异性强，对其他亚型AIV和禽呼吸道病原体检测结果为阴性；敏感性高，H5、H7和 H9亚型 AIV RNA的最低检出量分别为10－4、10－4、10－2拷贝／μL。初步建立了快速、敏感、特异地鉴别检测 H5、H7和 H9亚型禽流感病毒的分子生物学诊断方法。