金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrD的原核表达及抗体制备

• 作者: 张洪娟 李萍 杜欣军 王学连 王硕 耿洁洁
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 表面蛋白 SdrD基因 重组表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 1-4,5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.611|S852.4
• 字数: 3655字
• 语种: 中文

摘要

根据金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrD基因序列设计特异性引物，以金黄色葡萄球菌标准菌株基因组为模板进行PCR扩增，获得了大小为2043 bp的基因片段。将基因片段连接至表达载体 pET26b，转入大肠埃希菌BL21（DE3）中用IPTG诱导表达。SDS-PAGE结果表明，SdrD基因获得了较好的表达，重组蛋白的分子质量约为99 ku。利用免疫亲和层析对目标蛋白进行纯化，获得了纯度较高的目标蛋白。用该蛋白免疫新西兰白兔制备了多克隆抗体，抗体效价达到1∶23000，为金黄色葡萄球菌基因工程疫苗的开发与性能评价，以及该致病菌免疫检测技术的开发奠定了基础。