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摘要:
目的:利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[HA 1~525个氨基酸(aa)],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/Hangzhou/1/2013(H7N9)]全长HA,以其为模板,PCR得到片段HA1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pPICZαA载体,转入毕赤酵母X33,ELISA筛选阳性克隆。发酵培养后,表达上清经PEG20000沉淀获取HA1-525,并用糖苷内切酶H( endo H)酶切分析其N-糖链。将制备的HA1-525免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测特异性HA7抗体滴度,红细胞凝集抑制实验分析血抑活性。结果培养上清用抗HA7抗体经ELISA检测,重组菌成功表达HA7,且Western印迹检测发现有特异性弥散条带,经endo H 酶切后, HA1-525为均一条带,相对分子质量约58×103,与理论大小相当,表明HA1-525存在甘露糖基化结构。 HA1-525两次免疫小鼠后可产生1∶36000的抗体滴度。以H7N9裂解苗为抗原,检测其血抑活性为1∶700。结论利用毕赤酵母表达的H7N9流感病毒HA1-525可以诱导小鼠产生针对HA7的中和抗体。
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文献信息
篇名 H7 N9流感病毒血凝素HA在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析
来源期刊 军事医学 学科 医学
关键词 H7 N9流感病毒 血凝素类 毕赤酵母 红细胞凝集抑制
年,卷(期) 2015,(6) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 448-452
页数 5页 分类号 R373.1
字数 3889字 语种 中文
DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.06.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘波 军事医学科学院生物工程研究所 32 100 6.0 9.0
2 吴军 军事医学科学院生物工程研究所 55 227 8.0 13.0
3 巩新 军事医学科学院生物工程研究所 33 121 6.0 10.0
4 唱韶红 军事医学科学院生物工程研究所 34 141 6.0 11.0
5 徐威 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 53 192 8.0 12.0
6 王莎 军事医学科学院生物工程研究所 1 6 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
H7 N9流感病毒
血凝素类
毕赤酵母
红细胞凝集抑制
研究起点
研究来源
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军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
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