鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株的构建及生物学特性

• 作者: 何雷 张春杰 李银聚 李静 程相朝 赵战勤 郁川 金修哲 陈松彪 陈桂华 颜云飞
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 鼠伤寒沙门菌SL1344 sipB基因 缺失株 生物学特性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 215-220
• 页数: 6页
• 分类号: S852.612
• 字数: 4613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.02.016

摘要

目的：为了研制更加安全的鼠伤寒沙门菌弱毒株，本研究构建了鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB基因缺失突变株。方法：首先构建含缺失585 bp sipB基因的重组自杀性质粒PREΔsipB，利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术，两步法筛选出SL1344的sipB缺失株。结果：PCR及测序结果表明SL1344ΔsipB构建成功。进一步生物学特性研究表明，缺失株SL1344ΔsipB保留了亲本菌株SL1344的血清型1，4，5，12：i：1，2，且能够稳定遗传缺失585 bp的sipB基因，生长速度没有发生明显改变；但是，与亲本株SL1344相比，其毒力发生明显改变，缺失株SL1344ΔsipB口服感染6周龄BALB／c小鼠的LD50为1.70×108 CFU，毒力较亲本株SL1344降低至1.4％，免疫保护效力实验显示，对6周龄BALB／c小鼠免疫后第17天，鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50％的保护率。在给小鼠免疫后第14天血清抗体IgG达到最高。结论：结果表明，SL1344ΔsipB基因缺失株构建成功，遗传稳定，毒力明显降低，且具有较好的免疫原性，为研究鼠伤寒沙门菌sipB基因与其致病力之间的关系提供了方法，并为研制安全有效的沙门菌疫苗弱毒株奠定了基础。