鹿人五毛滴虫巢式PCR检测方法的建立

• 作者: 余裕强 宫鹏涛 张西臣 李建华 李显赫 李智鹏 董兵
• 来源期刊: 天津农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹿 肠道毛滴虫 巢式PCR
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 植物生理与生物技术
• 页码范围: 7-10,22
• 页数: 5页
• 分类号: S852.72
• 字数: 3344字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6500.2015.05.002

摘要

为了建立鹿人五毛滴虫巢式PCR检测方法并进行验证,根据人五毛滴虫18SrRNA基因的特异性片段设计巢式PCR特异性引物,对两轮PCR反应的退火温度和反应体系中Mg2+浓度进行探索和优化,在此基础上,进一步通过灵敏性和特异性的检测.采用建立的巢式PCR检测方法对68份鹿粪便样品进行检测.结果表明,建立的巢式PCR方法,第一轮PCR最适退火温度为53℃,第二轮PCR最适退火温度为53℃;镁离子浓度为2.5 mmol· L-1.对鹿人五毛滴虫的检测精度可达每毫升10个虫体DNA;对犬贾第虫、阴道毛滴虫、弓形虫、柔嫩艾美尔球虫、大肠杆菌、旋毛虫基因组DNA的扩增的结果均为阴性;68份鹿粪便样品鹿人五毛滴虫的检出率为50％.由此可见,建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于鹿人五毛滴虫感染的临床检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张西臣	吉林大学动物医学学院	211	623	11.0	18.0
2	李建华	吉林大学动物医学学院	302	1731	21.0	33.0
3	宫鹏涛	吉林大学动物医学学院	134	291	8.0	14.0
4	余裕强	吉林大学动物医学学院	2	1	1.0	1.0
5	董兵	吉林大学动物医学学院	3	4	1.0	2.0
6	李显赫	吉林大学动物医学学院	3	2	1.0	1.0
7	李智鹏	吉林大学动物医学学院	2	0	0.0	0.0