基于同源加尾系统的改良分子信标荧光PCR检测香港海鸥形菌方法的建立

• 作者: 孙菲 胡苏 邱亚群
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 香港海鸥形菌 荧光PCR HAND系统
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3375字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2015.01.011

摘要

目的 针对香港海鸥形菌,利用同源加尾系统(Homo Tag Assisted Non-Dimer,简称HAND)建立一种基于改良分子信标的荧光PCR检测方法,并对这种方法进行条件优化和评价. 方法 根据香港海鸥形菌的基因保守序列16S-rDNA基因设计探针和特异性引物,并在引物的5'端加上同源尾巴序列,减少或避免引物二聚体的形成,通过优化通用尾巴引物和特异性加尾引物的浓度与反应温度等PCR参数构建荧光PCR的反应体系. 结果 建立的基于HAND系统的改良分子信标PCR的检测体系引物二聚体明显减少,检出限达到20 CFU/ml. 结论 建立的基于HAND系统的改良分子信标荧光PCR检测方法具有检测时间短、灵敏度高、特异性好的优点,能够应用于香港海鸥形菌的快速筛查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱亚群		43	198	8.0	10.0
2	孙菲		15	54	4.0	6.0
3	胡苏		1	2	1.0	1.0