应用复合探针实时荧光定量RT-PCR技术高灵敏度检测呼吸道合胞病毒

• 作者: 刘琪琦 孙晓彦 王升启 罗琳 郑胜男 陈苏红
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 呼吸道合胞病毒 复合探针 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2015,（13）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 2401-2404,2422
• 分类号: R115
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种运用复合探针实时荧光定量PCR技术检测呼吸道合胞病毒(RSV)的方法.方法 根据复合探针技术原理,以其F蛋白基因作为基因靶序列建立检测方法,对引物与探针进行优化与筛选;对检测的灵敏度、特异性、精密度等进行评价,并通过对259例临床标本的检测对本方法的检测效果进行评估.结果 本方法的检测灵敏度RSV A型可达2.0×102 PFU/ml、RSV B型最低可达5.0×102 PFU/ml;与非呼吸道合胞病毒等常见呼吸道病毒均无交叉反应;批间批内变异系数均小于5％;与临床咽拭子标本的检测结果对比表明,该方法与临床诊断结果的符合率为99.23％.结论 该方法建立的荧光定量RT-PCR检测技术能够快速、准确、特异、高灵敏度的对呼吸道合胞病毒核酸进行定性分析,为呼吸道合胞病毒的临床检测提供了新的、更为有效的检测方法.