柚皮苷对高糖诱导的血管内皮细胞损伤及PI3 K／AKT／eNOS 信号通路的影响

• 作者: 严国强 储佳佳 孔滢 李积东 李腾 沈小丹 温见炳 雷霖 黄起壬
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐静脉内皮细胞 高糖 柚皮苷 内皮型一氧化氮合酶
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 625-629
• 页数: 5页
• 分类号: R363.2
• 字数: 3174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.04.009

摘要

目的：研究柚皮苷（ naringin，Nar）对高糖（ high glucose，HG）诱导人脐静脉内皮细胞（ human umbili-cal vein endothelial cells，HUVECs）损伤的作用及对PI3K／AKT／eNOS信号通路的影响。方法：利用 HG（33 mmol／L glucose）培养基孵育HUVECs不同时间（6、12、24、48、72 h）后，用胰岛素（5 mIU／L）刺激细胞15 min，建立内皮细胞损伤模型，分别测定各组上清液中NO水平、细胞中eNOS和磷酸化eNOS（ p-eNOS）的水平。对损伤的HUVECs用不同浓度的Nar （5、10、25、50、100 mg／L）孵育不同时间（6、12、24、48和72 h），用胰岛素（5 mIU／L）刺激细胞15 min，检测细胞上清中的NO水平，观察Nar对HG诱导HUVECs 损伤的作用。对损伤细胞先分别用PI3K抑制剂LY294002（10μmol／L）和AKT抑制剂AKT inhibitorⅣ（0.5μmol／L）预处理24 h，再用50 mg／L的Nar处理24 h，用胰岛素（5 mIU／L）刺激细胞15 min，检测细胞上清中NO的水平，以及eNOS、p-eNOS、PI3K、AKT及p-AKT的蛋白水平，探讨Nar减轻HG对HUVECs损伤作用的机制。结果： Nar的量效和时效结果显示，50 mg／L Nar预处理HU-VECs 24 h后，其减轻HG对HUVECs损伤的作用最为显著，表现为NO和p-eNOS的水平升高（ P＜0.05）。加入PI3K和AKT抑制剂后，Nar减轻HG致内皮细胞的损伤及上调p-eNOS和NO水平的作用完全取消（P＜0.05）。结论：Nar能减轻HG诱导的血管内皮细胞损伤，其作用机制可能是通过PI3 K／AKT／eNOS信号通路介导的。