大肠埃希菌JM109表面抗原 Ag43基因敲除与鉴定

• 作者: 周松森 林映莹 谭光宏 赵焕阁 黄用豪 黄风迎
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原Ag43 基因敲除 细菌表面表达 Ⅱ组内含子 表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（31）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 4330-4332
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 3484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2015.31.004

摘要

目的：敲除大肠埃希菌JM109表面抗原43（Ag43）基因并对其进行鉴定。方法采用Sigma公司的TargeTron基因敲除系统和Ag43基因特异设计的PCR引物扩增获得突变Ⅱ组内含子RNA蛋白复合体（RNP）基因序列，然后将这段基因序插入表达RNP的质粒pACD4K‐C中，获得Ag43特异的重组RNP质粒pACD4K‐Ag43。最后将pACD4K‐Ag43转化JM109，经过IPTG诱导表达将Ⅱ组内含子插入Ag43特异的部位。结果通过软件分析发现插入Ⅱ组内含子的最佳位点位于碱基1812和1913之间，琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增的突变Ⅱ组内含子RNP基因序列分子量大小和预期值（350 bp）相一致，用NheⅠ和HindⅢ二种酶切分析重组质粒pACD4K‐Ag43结果和预期值相符，PCR扩增相应产物和基因测序显示Ⅱ组内含子特异地插入Ag43基因碱基序列的1812／1913位点。结论成功地将大肠埃希菌JM109中的基因敲除，为更进一步深入研究Ag43基因的功能和将其作为制备重组Ag43嵌合蛋白的宿主菌奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭光宏	海南医学院海南省热带病重点实验室	43	127	8.0	9.0
2	黄风迎	海南医学院海南省热带病重点实验室	26	48	4.0	5.0
3	赵焕阁	海南医学院海南省热带病重点实验室	17	38	3.0	5.0
4	林映莹	海南医学院海南省热带病重点实验室	17	38	3.0	5.0
5	黄用豪	海南医学院海南省热带病重点实验室	25	52	3.0	6.0
6	周松森	海南医学院海南省热带病重点实验室	1	0	0.0	0.0