纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组

• 作者: 姜英辉 崔淑华 张铁军 徐彪 李正义 梁成珠 王骏 罗继 贾俊涛
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 纳升及反相液相色谱-串联质谱 麦氏弧菌 蛋白质组
• 年，卷（期）: 2015,（33）
• 所属期刊栏目: 食品科学·农产品加工
• 页码范围: 156-158,183
• 页数: 4页
• 分类号: S182
• 字数: 3435字
• 语种: 中文

摘要

[目的]较系统地研究分析麦氏弧菌提取蛋白质.[方法]利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和纳升级反相液相色谱-串联质谱(nano-RPLC-MS/MS)法系统分析了来源于美国龙虾的一株麦氏弧菌F5-1提取总蛋白和总蛋白直接酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质.纳升级反相液相色谱分析条件为:上样量为5ul,经C18预柱(200 μm ×0.5 mm,3μmn,120 A)脱盐10 min,再经过ChromXPC18-CL毛细管柱(75 μm×15 cm,3μ,m,120 A)分析,2％乙腈(0.1％甲酸)-98％乙腈(0.1％甲酸)梯度洗脱90 min,采用ESI-Q-TOF MS,在IDA采集模式下分析鉴定麦氏弧菌提取总蛋白酶解产物.[结果]直接酶解鉴定到1 538种蛋白质,通过Gene Ontolo-gy分析了麦氏弧菌F5-1提取总蛋白的分子功能、生物进程和细胞组分.提取的麦氏弧菌蛋白具有催化、结合、结构分子、转录调节因子等功能活性,其中催化活性的蛋白比例较大,且多为参与代谢进程的相关酶类.[结论]研究可为麦氏弧菌蛋白质组学的深入研究奠定基础.