乙型肝炎病毒X蛋白对Polo样激酶1表达的调控作用

• 作者: 屠静 张婷 曾浈浈 程锦 陈香梅 鲁凤民
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 X蛋白 Polo样激酶1 蛋白稳定性 表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 字数: 4411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2016.01.009

摘要

目的 探索乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对Polo样激酶1(Plk1)的表达调控作用.方法 pCMV-HA-HBx表达质粒瞬时或稳定转染HepG2细胞,Western blot检测HBx对Plk1蛋白水平的影响;采用荧光素酶活性实验检测HBx对Plk1基因启动子活性的影响,实时荧光定量PCR检测HBx对Plk1 mRNA水平的影响;采用Cycloheximide阻断新蛋白合成后检测HBx对Plk1蛋白半衰期的影响;流式细胞仪技术检测HBx对细胞周期的影响.组间数据比较采用t检验. 结果 Western blot结果显示,瞬时和稳定表达外源HBx蛋白都能显著上调S期HepG2细胞的Plk1蛋白相对水平(1.242±0.133与2.683±0.396,P＜0.05;1.340±0.128与3.683±0.349,P＜0.01).荧光素酶活性和实时荧光定量PCR实验证实,HBx对Plk1基因的转录水平无影响,而Western blot实验证实HBx能抑制S期Plk1蛋白的泛素化降解,使Plk1蛋白半衰期由30 min延长至90 min.与对照组相比,HBx过表达能促进S期和G2/M期细胞比例的增加(分别为31.65％与24.56％,9.43％与4.47％),G0/G1期细胞比例的减少(58.92％与70.97％).结论 HBx能通过抑制S期Plk1蛋白的降解进而上调Plk1蛋白的水平.