慢病毒介导的靶向NDV P基因shRNA对NDV复制的抑制作用

• 作者: 张琳 张秀美 杨少华 胡北侠 许传田 黄庆华 黄艳艳
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 shRNA P基因 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-45
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65|R373.9
• 语种: 中文

摘要

小干扰RNA(siRNA)诱导的RNA降解可以特异性地抑制病毒感染,它作为一种有效的抗病毒治疗方法正被广泛研究.为了探讨慢病毒介导的shRNA对NDV复制的抑制效果,从而为新城疫病毒的抗病毒研究奠定基础,本研究以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)P基因为靶基因,构建了靶向NDV P基因的shRNA重组慢病毒表达载体RNAi-341和RNAi-671.将其与辅助细胞共转染293T细胞,获得包装好的重组慢病毒;在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)和SPF鸡胚上进行了干扰实验,并通过荧光定量PCR和病毒滴度测定检测shRNA对NDV的抑制效果.结果发现,RNAi-341和RNAi-671均能抑制FLAG-P蛋白在293T细胞中的瞬时表达.在CEF细胞感染后16h后,NDV的病毒滴度分别降低了66.6倍和30.6倍;在鸡胚感染48h后,RNAi-341和RNAi-671组NDV病毒的增殖量分别减少99％和98％.RNAi-341与RNAi-671不仅能抑制P基因的转录,还能显著降低NP、M、F、HN和L基因的转录水平.与RNAi-671相比,RNAi-341的抑制效果更好.研究结果表明,慢病毒介导的靶向P基因的shRNA具有抗病毒作用,能够抑制NDV在CEF和鸡胚中的复制,从而为临床防治NDV提供一个新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秀美		111	496	11.0	17.0
2	胡北侠		49	275	9.0	14.0
3	黄艳艳		43	207	8.0	12.0
4	杨少华		48	391	12.0	17.0
5	黄庆华		28	145	7.0	11.0
6	张琳		14	39	2.0	6.0
7	许传田		15	37	4.0	5.0