荧光定量PCR检测猪链球菌2型主要毒力因子方法的建立

• 作者: 凌淑萍 叶宇飞 吕燕 吴银良 许秀琴 赵健 陈国
• 来源期刊: 宁波农业科技
• 关键词: 猪链球菌2型 荧光定量PCR 毒力因子
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 2-6
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

本实验根据猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的3种主要毒力因子(荚膜多糖,capsular polysaccharide 2J,CPS2J;溶菌酶释放蛋白,muramidase-released protein,MRP;胞外因子,extracellular protein factor,EF)的基因序列,分别设计合成了3对引物及相应的Taqman探针,其中CPS2J和MRP的5 '端标记FAM荧光发射基团,EF的5’端标记HEX荧光发射基团,3’端均标记BHQ1淬灭荧光基团.通过优化反应体系和程序,建立了一种基于Taqman探针法用于检测3种主要毒力因子的荧光定量PCR方法,其中CPS2J单独检测,MRP与EF的实行双重荧光PCR方法检测.结果显示:CPS2J、MRP和EF的最低检测限分别为12CFU、51CFU和51CFU,灵敏度很高;与其他病原菌无交叉反应,重复性及特异性均较好,P＜0.05;而且整个检测过程在60min内完成,快速方便.因而本实验所建立的双重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可用于同时快速检测猪链球菌2型3种主要毒力因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许秀琴		28	77	5.0	8.0
2	吴银良		74	210	8.0	12.0
3	赵健		52	177	8.0	11.0
4	吕燕		27	71	4.0	7.0
5	陈国		51	167	7.0	11.0
6	凌淑萍		10	5	1.0	1.0
7	叶宇飞		21	101	6.0	10.0