减数分裂重组关键蛋白MLH1结合蛋白的酵母双杂交筛选和鉴定

• 作者: 平萍 殷毅
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精子发生 减数分裂 重组蛋白质类
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 16-20,29
• 页数: 6页
• 分类号: R321.1
• 字数: 3859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2016.01.004

摘要

目的：探寻减数分裂关键重组蛋白MLH1在精子发生中的结合蛋白。方法以MLH1为诱饵，通过酵母双杂交系统，在小鼠睾丸组织的cDNA文库中进行筛选，寻找MLH1的相互作用蛋白并通过GST pull-down和免疫共沉淀的方法进行验证。结果通过酵母双杂交的筛选，在小鼠睾丸中经四缺板筛出蛋白29个，包括已知的MLH3和PSM2等。通过GST Pull-down和免疫共沉淀验证了其中一个新的蛋白RHNO1与MLH1的结合。通过Real-time PCR检测发现RHNO1在睾丸中高表达，提示RHNO1在精子发生中具有重要功能。结论酵母双杂交系统是寻找结合蛋白的有力手段，发现了新的MLH1结合蛋白RHNO1,可能参与了减数分裂同源重组。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	平萍	上海交通大学医学院	38	180	8.0	12.0