从生食鱼肉中提取GⅡ型诺如病毒的不同方法的比较

• 作者: 杨燕 杨美成 范一灵
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 诺如病毒 提取 鱼肉 生食 水产品 实时荧光定量反转录PCR 回收率 检测
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法
• 页码范围: 753-758
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2016.06.014

摘要

目的 本研究比较了多种可能适用于生食水产鱼肉中诺如病毒(NoV)的提取方法.方法 人工污染GⅡ型NoV三文鱼肉样品,通过病毒洗脱、浓缩、核酸提取,以及实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测等步骤的比较和优化,提高样品中NoV的检测成功率和回收率.结果 采用Tri/Glycine/Beef extract缓冲溶液洗脱、PEG/NaCl溶液沉降、增加氯仿-正丁醇(1∶1,V/V)溶液萃取等步骤,可以有效富集样品中的NoV,并有效去除样品中的PCR抑制成分.优化后的检测方案可以将人工污染GⅡ型NoV的鱼肉样品的回收率由不足3％提高至15.15％,检测灵敏度可以达到17.3 RT-PCRU/25 g.结论 优化后的病毒提取方法具有良好的耐用性和重现性,适合于生食水产鱼肉中NoV的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨美成		60	268	8.0	13.0
2	杨燕		12	63	5.0	7.0
3	范一灵		22	120	6.0	10.0