微滴式数字PCR检测冷冻草莓中GⅠ、GⅡ型诺如病毒

• 作者: 姜帆 孙涛 岳志芹 房保海 梁成珠 王群 王雪晴
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 逆转录微滴数字PCR(RT-ddPCR) 诺如病毒 冷冻草莓
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 89-94
• 页数: 6页
• 分类号: TS207
• 字数: 5002字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.02.015

摘要

目的:建立一种检测冷冻草莓中诺如病毒(GⅠ和GⅡ)的逆转录微滴数字PCR(RT-ddPCR)方法.方法:根据ISO标准选定检测引物,优化反应体系,退火温度,进行了方法学实验,建立了一种快速检测冷冻草莓中GⅠ和GⅡ亚型诺如病毒的新方法.结果:确定了数字PCR检测GⅠ型诺如病毒退火温度为56.5℃,GⅡ型诺如病毒退火温度为58.1℃.RT-ddPCR检测GⅠ质粒标准品标准曲线的R2=0.9947,RT-ddPCR检测GⅡ质粒标准品标准曲线的R2=0.9950,说明该方法具有良好的线性关系.与RT-qPCR灵敏度对比,RT-ddPCR法的灵敏度比RT-qPCR法高一个数量级.在检测范围内,最低检测限低至个位拷贝数.RSD最小为3.8％,表明该实验重复性良好.浓度较低100 copies/μL左右时,RT-ddPCR的重复性不佳.结论:本研究建立的诺如病毒数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于冷冻草莓中诺如病毒的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王群		2	4	1.0	2.0
2	孙涛		3	2	1.0	1.0
3	王雪晴	中国海洋大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
4	房保海		1	0	0.0	0.0
5	姜帆		1	0	0.0	0.0
6	岳志芹		1	0	0.0	0.0
7	梁成珠		1	0	0.0	0.0