牛源材料中BVDV检测方法的验证及应用

• 作者: 刘军 刘艳 郭敏 魏至栋 鱼轲
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物制品 牛源材料 牛病毒性腹泻病毒 一步法RT-PCR 验证
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 36-39
• 页数: 4页
• 分类号: Q93-332
• 字数: 3149字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2016.01.008

摘要

目的 对生物制品生产过程中使用的牛源材料(牛血清、牛源细胞等)进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测以保证制品的生物安全性.方法 参照制药质量体系Q10(ICH Q10)对杂质的定性检测要求,采用一步法RT-PCR检测BVDV的5'-UTR保守区,并对其特异性、敏感性和重复性进行验证,然后将其应用于牛源材料中BVDV的检测.结果 扩增产物为250 bp的目的片段,测序后经序列比对分析软件BLAST比对,同源性达99％,且与其他5种牛源病毒均无相关性;敏感度达1CCID5o/mL.应用该方法对牛血清、牛鼻甲骨细胞(BT)、牛肾原代细胞、MDBK细胞等样品进行检测,15份为阳性,阳性检出率为12％.结论 一步法RT-PCR检测BVDV,特异性强、重复性好、敏感性高,可用于牛源材料中BVDV的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鱼轲	兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心	10	35	3.0	5.0
2	魏至栋	兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心	30	64	5.0	6.0
3	郭敏	兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心	8	15	2.0	3.0
4	刘军	兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心	1	1	1.0	1.0
5	刘艳	兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心	3	1	1.0	1.0