家蚕蚕蛹过敏原CPH30的表达、纯化、免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测

• 作者: 刘志刚 梁志林 王良录 胡维
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 CPH30蛋白 过敏原 免疫学鉴定 B细胞表位 免疫原性
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 377-381
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2016.04.002

摘要

[目的] 克隆、表达纯化出家蚕Bombyx mori蚕蛹过敏原蛋白CPH30(cuticular protein hypothetical 30 precursor),并对其进行免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测.[方法] 通过蛋白组学方法分析CPH30蛋白的潜在过敏原性,人工化学合成该蛋白基因,将基因连接到pET-28a载体上,重组质粒转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21,IPTG诱导基因表达.通过镍亲和层析获取高纯度蛋白,用Western blot方法对蛋白进行免疫学鉴定.通过DNAStar软件分析其潜在的B细胞表位.[结果] 成功构建出CPH30基因的表达载体;表达纯化出CPH30蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示分子量为25 kDa左右;Westem blot结果显示,CPH30蛋白与家蚕过敏患者血清具有IgE结合性,证明CPH30具有免疫原性;利用DNAStar软件成功分析出氨基酸序列第57-69和150-158位为潜在的B细胞表位.[结论] 成功克隆表达出CPH30蛋白,并成功鉴定出其免疫原性,为家蚕蚕蛹过敏反应性疾病的特异性诊断和疫苗治疗奠定理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	梁志林	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	5	8	2.0	2.0
3	胡维	深圳大学生命与海洋科学学院	5	4	1.0	2.0
7	王良录	北京协和医院变态反应科	9	33	3.0	5.0