细胞外钾对 HERG 基因无义突变L539 fs／47表达的调控

• 作者: 刘仲伟 吕颖 孙超峰 张军波 张爱峰 潘军强 潘硕 王军奎 韩稳琦
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HERG基因 无义突变 细胞外钾 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 228-233
• 页数: 6页
• 分类号: R541.7|R363
• 字数: 4110字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2016.02.006

摘要

目的：研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs／47蛋白表达的影响。方法：用脂质体转染法将野生型HERG（WT）及其突变体HERG-L539fs／47（MT）分别转染HEK293细胞36 h后，0.8、4.3及10 mmol／L的钾干预6 h，流式细胞术检测HERG蛋白表达量；干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果：用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上；而HERG突变体L539fs／47蛋白大部分滞留胞浆；并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多（ P＜0.01），WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组（ P＜0.05）。免疫印迹显示，不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带，突变体仅60 kD 1个条带，3个条带均受细胞外钾影响（ P＜0.05）。结论：细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性，持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。