Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒VP4、VP35蛋白多克隆抗体制备及其免疫原性分析

• 作者: 吕利群 宗乾坤 张也
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒 原核表达 VP4蛋白 VP35蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 页码范围: 355-362
• 分类号: Q511|S965.112
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20151110160

摘要

为建立针对Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的血清学检测方法,分别构建了GCRVJX02株外衣壳蛋白VP4、VP35的原核重组表达质粒PGEX-4T-3-S6、PGEX-4T-3-S 11,用纯化的重组蛋白rVP4、rVP35分别免疫小鼠制得相应的多克隆抗体,用间接ELISA方法测定2种抗体的效价,用Western Blot鉴定抗体的特异性.SDS-PAGE分析细菌表达的rVP4、rVP35大小分别约为98ku和61ku,且都主要以包涵体的形式存在;间接ELISA方法测定制备的抗体效价分别约为l:4×105和1:106;Western Blot结果显示,制备的2种多克隆抗体都既能够识别原核表达的重组蛋白,又能够识别JX02毒株上的对应蛋白,并且发现感染JX02的草鱼血清中存在结合VP4、VP35的相应抗体.本研究制备的2种多克隆抗体都具有良好的生物学特性,并且这2种重组蛋白作为相应抗体捕获原可以用于通过检测抗病毒抗体来确诊草鱼是否感染Ⅱ型GCRV.本研究将为GCRV主要流行株血清学检测方法的建立以及VP4、VP35蛋白相关功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕利群	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水种质资源重点实验室	30	150	7.0	11.0
5	张也	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水种质资源重点实验室	5	14	2.0	3.0
6	宗乾坤	上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水种质资源重点实验室	1	8	1.0	1.0