大口黑鲈溃疡综合征病毒 MCP 基因的原核表达及重组蛋白的免疫效果初步分析

• 作者: 曹婷婷 江小燕 白俊杰 蔡磊 邓国成 马冬梅
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 大口黑鲈 溃疡综合征病毒 主要衣壳蛋白 原核表达 免疫效果
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 139-144
• 页数: 6页
• 字数: 4223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.021

摘要

为了预防近年来流行于广东省养殖大口黑鲈（Micropterus salmoides）中的病毒性溃疡综合征，以大口黑鲈溃疡综合征病毒（Largemouth bass ulcerative syndrome virus，以下简称 LBUSV）的主要衣壳蛋白（MCP）作为目标抗原蛋白，将 MCP 基因开放阅读框插入到 pBV220载体中，转化大肠杆菌 DH5α，构建重组表达 MCP 蛋白的工程菌。重组菌经过42℃温度诱导和 SDS-PAGE 电泳，检测到在分子量51 kD 处有一条特异表达蛋白带，重组蛋白约占重组菌体总蛋白的30%。重组 MCP 蛋白经洗涤、纯化、溶解、复性和透析后纯度达90%以上。将纯化后的重组蛋白与不完全弗氏佐剂混合、乳化后，免疫大口黑鲈，然后进行感染实验，感染后20 d 疫苗保护率最高达67.7%。结果表明，该病毒 MCP 蛋白具有一定的免疫原性，可以作为制作重组疫苗的候选蛋白。