口服法舒地尔治疗EAE对巨噬细胞、T细胞及TLR／NF-B通路的作用研究

• 作者: 于婧文 刘建春 刘春云 宋国斌 尉杰忠 张海飞 张辉 李自青 李艳花 王青 肖保国 马存根
• 来源期刊: 中国神经免疫学和神经病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑脊髓炎 ,自身免疫性 ,实验性 巨噬细胞 TLR/NF- B通路 神经通路
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 172-176
• 页数: 5页
• 分类号: R744.5+1
• 字数: 3442字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2963.2016.03.003

摘要

目的：探讨口服盐酸法舒地尔（Fasudil ）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental allergic encephalomyelitis ，EAE）小鼠巨噬细胞及TLR／NF‐ B通路的作用。方法采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35‐55肽（myelin oligodendrocyte glycoprotein 35‐55 peptide ，MOG35‐55）诱导C57BL／6小鼠建立EAE模型，将EAE小鼠随机分为EAE模型组和Fasudil治疗组，免疫后第3天给予Fasudil治疗组小鼠Fasudil灌胃干预，直到免疫后第27天，EAE模型组同样处理给予等量生理盐水。光镜观察脊髓组织CD4＋ T细胞／CD68巨噬细胞表达的变化，Western blot法测定脊髓诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg‐1）、Toll样受体2（TLR‐2）、TLR‐4和磷酸化核因子 B（p‐NF‐ B）蛋白的表达，ELISA法测定培养72 h脾细胞分泌细胞因子的含量。结果与EAE模型组比较，Fasudil组CD4＋ T细胞数和CD68巨噬细胞数明显减少（P＜0.01），巨噬细胞M1表型iNOS表达减少（P＜0.05），M2表型Arg‐1表达增加（P＜0.01），炎性通路蛋白p‐NF‐ B、TLR‐2和TLR‐4表达减少（P＜0.05），外周细胞炎性因子白细胞介素‐6（IL‐6）、IL‐1β、肿瘤坏死因子α（TNF‐α）、干扰素γ（IFN‐γ）和IL‐17分泌减少（P＜0.05），而IL‐10分泌增加（P＜0.05）。结论口服Fasudil可抑制CD4＋ T细胞／CD68巨噬细胞的激活，促进巨噬细胞表型M1向M2转化，抑制脊髓组织中p‐NF‐ B、TLR‐2和TLR‐4的表达，抑制外周免疫细胞炎性因子分泌，而增加IL‐10的分泌。