WNK3激酶高表达对白介素-1β诱导HEK293细胞凋亡的保护作用

• 作者: 余灵芳 叶晓华 庄捷秋 杨青 林洪洲 王德选 郑雯洁
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: WNK3 JNK 白介素-1β 肾脏 凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S941.42
• 字数: 4267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2016.01.001

摘要

目的:观察WNK3激酶高表达对白介素-1β(IL-1β)诱导人胚肾细胞(HEK293细胞)凋亡的作用.方法:HEK293细胞分为3组:Vector+NS组、Vector+IL-1β组和WNK3+IL-1β组.Vector+NS组、Vector+IL-1β组转染对照Vector,WNK3+IL-1β组转染WNK3.药物干预时,Vector+NS组加入等量0.9％氯化钠溶液,Vector+IL-1β组、WNK3+IL-1β组加入10 ng/mL IL-1β.分别于培养0、12、24、36和48 h时,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性.孵育0、18、36 h时应用Western blot法检测Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleaved Caspase-9等凋亡蛋白.在IL-1β干预0、30、60 min时采用Western blot法检测JNK通路蛋白.结果:Vector+IL-1β组在给药后细胞活性逐渐下降,在48 h达到最低值,WNK3+IL-1β组下降幅度较缓和,与同时间点Vector+IL-1β组比较细胞活性回升,在48 h时差异有统计学意义(P＜0.01).IL-1β孵育后cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达量增加.与36 h的Vector+IL-1β组比较,WNK3+IL-1β组的cleaved Caspase-3显著减少,2组的cleaved Caspase-9在18 h及36 h时差异亦存在统计学意义(P＜0.05).WNK3转染后p-JNK的表达水平较未转染WNK3组的上升幅度降低(P＜ 0.05).结论:IL-1β诱导HEK293细胞活性下降,而转染wNK3质粒可以有效逆转部分细胞活性.wNK3激酶通过减少JNK的磷酸化抑制Caspase途径的活化,减少细胞凋亡,起到在不利条件下保护肾脏细胞的作用.