下调miR-221表达抑制子宫颈癌细胞恶性生物学行为及其作用机制

• 作者: 任兴业 吴淑霞 潘雨露 石翠格
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 子宫颈癌 miR-221抑制剂 细胞凋亡 恶性生物学行为 作用机制
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 640-645
• 分类号: R737.33|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.05.009

摘要

目的:探讨下调miR-221表达对子宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制.方法:运用脂质体2000转染法将miR-221抑制剂和阴性对照核苷酸片段(NC)转染子宫颈癌细胞HeLa、C33A、SiHa和Caski细胞,用Western blotting和Real-time PCR分别检测ARID1A(miR-221靶蛋白)、cleaved caspase 3、caspase 3、cleaved PARP、PARP、MMP-9、MMP-13、TIMP-3蛋白表达水平和miR-221、MMP-9、MMP-13、TIMP-3 mRNA的表达水平;用MTT法、克隆形成实验、AnnexinV-FITC/PI染色结合流式细胞术分别测定细胞增殖、克隆形成率和细胞凋亡率.结果:与阴性对照组比较,(1) miR-221抑制剂转染的HeLa、CC3A、SiHa和Caski细胞miR-221表达量均显著降低[(0.23±0.01)、(0.31±0.02)、(0.34±0.01)、(0.37±0.02),F=25.44,P＜0.05];(2)转染的细胞随着培养时间的增加细胞存活率逐渐下降,具有时间依赖效应,48 h之后细胞存活率显著低于阴性对照组(F=37.42,P＜0.05);细胞的克隆形成率显著降低(F=43.58,P＜0.05);培养72 h时细胞凋亡率分别为:HeLa(27.92±3.47)％、C33A(20.84±4.31)％、SiHa(18.81±2.18)％、Caski(19.86±3.82)％,均显著高于对照组(F =54.78,P＜0.05);(3)转染细胞下调miR-221表达后促进cleaved caspase 3、cleaved PARP、TIMP-3蛋白表达,抑制MMP-13蛋白表达;降低MMP-13 mRNA表达(=37.50,P＜0.05),增加TIMP-3 mRNA表达(t=46.30,P＜0.05).结论:下调miR-221表达能抑制子宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制与激活caspase信号通路从而诱导细胞凋亡以及调控MMP-13和TIMP-3的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘雨露	济南市第五人民医院妇产科	9	7	1.0	2.0
2	吴淑霞	济南市第五人民医院妇产科	4	8	1.0	2.0
3	任兴业	济南市第五人民医院妇产科	13	19	2.0	4.0
4	石翠格	中国计划生育研究所细胞生物实验室	2	7	1.0	2.0