一种具有高β-葡聚糖酶活性的几丁质外切酶基因的克隆、表达和性质鉴定

• 作者: 冉超 周志刚 杨雅麟 胡俊 霍凤敏
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 几丁质酶 Chi92 维氏气单胞菌 斑马鱼
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 787-803
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150309

摘要

[目的]表达并鉴定来源于维氏气单胞菌的几丁质酶Chi92并研究其作为水产饲用酶的有效性.[方法]自A.veronii B565中克隆chi92基因并在Pichia pastoris GS115中进行表达,对表达成功的Chi92进行分离纯化和生化鉴定.最后将Chi92添加到含有毕赤酵母粉的饲料中饲喂斑马鱼2周,研究Chi92添加对斑马鱼生长、饲料利用率、肠道微绒毛形态和抗病性能的影响.[结果]chi92基因编码具有864个氨基酸残基的多肽.Chi92在pH 6.0和40℃时表现最佳酶活.Chi92对蛋白酶有抗性,同时酶活不受金属离子显著影响.Chi92具备高几丁质酶活(69.4 U/mL).以胶体几丁质和β-1,3-1,4-葡聚糖作为底物时,比活力分别为809.2 U/mg和235.6 U/mg.薄层层析和电喷雾电离质谱联用技术均表明N-乙酰葡糖胺二聚体是Chi92酶解胶体几丁质的主要产物.Chi92在对酵母细胞壁的降解方面比其他几丁质酶性能更加优良.经过2周饲喂,添加有Chi92的饲料显著提高了斑马鱼肠道微绒毛的高度和密度,同时斑马鱼的生长,饲料利用率,以及抗病性能均得到了一定提高.[结论]Chi92具有pH稳定性、抗逆性和高酵母细胞壁降解功能,能较好地作为饲用酶用于温水水产养殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨雅麟	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室	20	214	7.0	14.0
2	周志刚	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室	26	254	10.0	15.0
3	霍凤敏	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室	2	2	1.0	1.0
4	冉超	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室	2	9	2.0	2.0
5	胡俊	中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点实验室	2	3	1.0	1.0