猪博卡病毒不同基因型三重 PCR 检测方法的建立及初步应用

• 作者: 周宏专 宏春慧 张晓东 徐福洲 杨兵 王金洛 苏霞 薛静 覃湘婕
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪博卡病毒 基因型 三重 PCR 检测
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|S436
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2016.02.003

摘要

为鉴别猪博卡病毒1型、2型和3型3种基因型，根据猪博卡病毒基因序列分别设计3对针对保守区域的引物进行 PCR 扩增，扩增目的片段大小分别为645 bp （PBoV1型）、352 bp（PBoV2型）和259 bp（PBoV3型）。通过引物浓度和退火温度等条件优化，首次建立了同时检测猪博卡病毒3种基因型的三重 PCR 方法。所建立的三重 PCR方法扩增其他猪病病毒结果均为阴性，最低检测限为8×10－7 ng ／μL。结果表明，该方法具有较好的特异性和敏感性。对临床样品进行三重 PCR 和单项 PCR 检测，对比结果显示符合率为100％。该方法的建立为猪博卡病毒3种不同基因型的鉴别检测提供了有效手段。