反转录环介导等温扩增技术检测甲型 H1 N1流感病毒的建立

• 作者: 刘金霞 孙殿兴 赵娜
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 甲型H1N1流感病毒 反转录环介导等温扩增(RT-LAMP) 可视化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 67-70
• 页数: 4页
• 字数: 3190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2016.01.018

摘要

目的通过应用反转录环介导等温扩增技术（ RT-LAMP）对甲型H1N1流感病毒进行基因检测，建立一种快速、简便的可视化核酸检测技术。方法先针对甲型H1 N1流感病毒HA基因区段，设计2对RT-LAMP引物。通过检测不同病毒评估引物的特异性，通过检测倍比稀释的临床样本确定RT-LAMP的灵敏度。用羟基萘酚蓝（ HNB）染料对产物进行可视化检测，同时用凝胶电泳进行结果验证。最后用RT-LAMP检测临床样本，使用卡方检验比较与TaqMan PCR的一致性。结果RT-LAMP的引物特异性好，可准确地使甲型H1N1流感病毒扩增。通过对稀释模板的检测，得出RT-LAMP的灵敏度为2.5×103拷贝／ml。 RT-LAMP扩增结果可通过HNB可视化判定，与凝胶电泳的效果相当。对RT-LAMP和TaqMan PCR的显著性差异经统计学评价，可知二者一致性较好（P＞0.05）。结论本研究实现了可视化检测甲型H1 N1流感病毒，具有更好的灵敏性，该技术在基层医疗机构有一定的实用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘金霞	承德医学院病原生物学实验中心	69	384	10.0	17.0
2	赵娜	中国人民解放军白求恩国际和平医院全军肝病诊治中心	41	119	6.0	10.0
3	孙殿兴	中国人民解放军白求恩国际和平医院全军肝病诊治中心	18	107	5.0	10.0